Alfatestlab offre un paquet d’analyse de base ainsi qu’un paquet d’analyse avancée, dans tous les cas nous fournissons
Analyse garantie à la livraison2
2 Après accord sur la date de livraison de l’échantillon
- Le paquet d’analyse de base comprend :
La concentration des EVs et des exosomes3
Alfatestlab fournira la concentration de votre échantillon d’EVs exprimée en nombre de particules par mL, en fonction du diamètre hydrodynamique, c’est-à-dire le nombre de particules par volume pour toute gamme de taille.
Chaque analyse est effectuée sur 5 réplicats, et les paramètres de diamètre hydrodynamique fournis sont : mode, moyenne, d10, d50, d90, écart-type. Cette analyse est extrêmement utile pour comparer des échantillons d’exosomes et évaluer le nombre relatif de particules dans une gamme de taille spécifique (30-130nm / 130-200nm, etc.). De plus, ces données de concentration exprimées en nombre de particules/mL peuvent être comparées aux données ELISA exprimées en protéine/mL.
3 Cette analyse nécessite des échantillons purifiés
Coloration de la membrane
Les données de concentration des EVs et des exosomes peuvent être mises en œuvre avec un marquage par fluorescence DIO, DII ou Cell Mask Orange afin de séparer les données des espèces lipidiques par rapport au reste des composants du mélange.
- Un progiciel d’analyse avancé permet une caractérisation multiparamétrique des EVs uniques.
Comptage, taille et phénotypage
Cette analyse ne nécessite AUCUNE PURIFICATION, le surnageant de culture cellulaire, le plasma, le sérum, l’urine et d’autres matrices peuvent être mesurés directement. Alfatestlab fournira les données de taille (<50nm) et de comptage de votre échantillon entier exprimées en nombre de particules par gamme de taille. Alfatestlab fournit des services de quantification de protéines et de colocalisation de protéines grâce à la capture spécifique d’antigènes.
Le profil standard des protéines membranaires des VE individuels est fourni sur la base des marqueurs ubiquitaires de tétraspanine CD9, CD63 et CD81 (option CD41a). Une coloration personnalisée pour l’analyse d’autres protéines d’intérêt est disponible sur demande.
Pureté : validation de votre méthode d’isolement des exosomes
En comparant la quantité d’EVs dans un fluide biologique brut par rapport à un échantillon isolé/purifié, Alfatestlab fournit l’outil parfait pour valider vos méthodes de purification à partir de cultures cellulaires avec ou sans EVs bovins, de plasma sanguin, de sérum sanguin, de liquide céphalorachidien (LCR), de salive, d’urine, de fluide folliculaire, de liquide synovial, etc.
Chargement et intégrité des EVs
Chez Alfatestlab, nous savons que comprendre l’efficacité avec laquelle vos produits thérapeutiques sont chargés dans les EVs et l’efficacité avec laquelle ils sont purifiés est une information cruciale. Alfatestlab peut fournir des mesures des protéines externes et internes au niveau de la vésicule unique. Les directives MISEV 2018 recommandent la détection des protéines cytosoliques intracellulaires dans le cadre des protocoles standard de caractérisation des VE. À cette fin, nous offrons la mesure des protéines cytosoliques intracellulaires, y compris ALIX et Syntenin. Les VE sont capturés, incubés avec jusqu’à trois anticorps ou colorants fluorescents, qui peuvent être ciblés contre la surface, puis perméabilisés pour permettre la détection des protéines luminales ou cibler des anticorps spécifiques sur la cargaison des VE. Les fractions de la sous-population des VE peuvent ensuite être quantifiées en termes de nombre de vésicules contenant des protéines de charge spécifiques.
